ابزار هدایت به بالای صفحه

ابزار وبمستر

نکته:لطفادر صورت امکان با مرورگر موزیلا اقدام به پرداخت نمایید-پس از پرداخت وجه (در مرورگر کروم دانلود بصورت خودکار انجام میشود با این تفاوت که دکمه دانلود فایل، غیر فعال می باشد ولی در مرورگر موزیلا پس از پرداخت وجه، هم دانلود اتوماتیک و هم دکمه دانلود فایل فعال می باشد ) -در صورت مشکل در دانلود فایل برای خریداران، به آی دی ایتا با تایپ کردن جملهFileok یا آی دی تلگرام با تایپ کردن جملهCsmok پیام دهید.تمامی فایل های آپلود شده در فایل اوکی، توسط کاربران در سایت قرار داده شده است و فایل اوکی هیچ مسئولیتی را در قبال محتوای آن نمی پذیرد.
بررسی مولکولی اینتگرون ها در بین ایزوله های اشریشیا کلی جدا شده از عفونت ادراری

بررسی مولکولی اینتگرون ها در بین ایزوله های اشریشیا کلی جدا شده از عفونت ادراری

پایان نامه کارشناسی ارشد زیست شناسی میکروبیولوژی- بررسی مولکولی اینتگرون ها در بین ایزوله های اشریشیا کلی جدا شده از عفونت ادراری /بخشی از متن:اشریشیا کلی عامل اصلی عفونت دستگاه ادراری است . اينتگرون ها از عوامل ژنتيكي متحركي هستند كه باعث گسترش و ...

دسته بندی: علوم پایه » زیست

تعداد مشاهده: 3968 مشاهده

فرمت فایل دانلودی:.docx

فرمت فایل اصلی: word

تعداد صفحات: 110

حجم فایل:1,050 کیلوبایت

  پرداخت و دانلود  قیمت: 39,500 تومان
پس از پرداخت، لینک دانلود فایل برای شما نشان داده می شود.
1 0 گزارش
  • توضیحات:

    پایان نامه دوره کارشناسی ارشد بررسی مولکولی اینتگرون ها در بین ایزوله های اشریشیا کلی جدا شده از عفونت ادراری 

     

    نکته: این پایان نامه فقط در وبسایت فایل اکی و بصورت انحصاری به فروش می رسد.

     

    قسمتی از متن:

    مقدمه و هدف:

    اشریشیا کلی عامل اصلی عفونت دستگاه ادراری است . اينتگرون ها از عوامل ژنتيكي متحركي هستند كه باعث گسترش و حمل ژن هاي مقاومت آنتي بيوتيكي در بين باكتري ها م ي گردند. هدف از انجام اين مطالعه تعيين الگوي مقاومت آنتي بيوتيكي، بررسي شيوع اينتگرون هاي كلاس يك، دو و سه وتعيين ارتباط آن در ايجاد مقاومت نسبت به آنتي بيوتيك ها در ايزوله هاي اشریشيا كلي جدا شده از عفونت هاي ادراري مي باشد.

    مواد و روش تحقیق: صد و بیست نمونه اشریشیا کلی از مهر 93 تا خرداد ماه سال 94 از بیمارستان های شهدا عشایر و مدنی شناسایی شدند. حساسیت ایزوله ها به آنتی بیوتیک ها به روش دیسک آگار دیفیوژن تعیین شد. سپس ایزوله های مقاوم به حداقل یکی از این آنتی بیوتیک ها جهت بررسی مولکولی انتخاب شدند.

    یا فته ها : بيش ترين مقاومت آنتي بيوتيكي در ايزوله هاي اشریشیا کلی  نالیدیکسیک اسید (89.1%) ، آمپی سیلین (87.5%)، سفوتاكسيم(78%)، سفتازيديم(78%)، تتراسايكلين (76%)، سيپروفلوكساسين(48%) بود . فراوانی اینتگرون کلاس یک در بین ایزوله ها 5/63% و فراوانی کلاس دو 9/14% بدست آمد.کلاس 3 یافت نشد.

    نتیجه گیری:

    ميزان شیوع اينتگرون كلاس يك درایزوله های اشریشياكلي مورد مطالعه بسيار بالا مي باشد، كه اين عامل احتمالاً مي تواند نقشي در تسهيل گسترش سويه هايي با مقاومت چند دارويي داشته باشد.

     

     

     

    مقدمه:

    عفونت های ادراری از جمله عفونت شایع در جوامع مختلف می باشند میزان شیوع این عفونت در افراد مسن و خانم های جوان بیشتر است . عامل بسیار مهم و اصلی این عفونت ها با کتری اشریشیای کلای از خانواده انترو باکتر یا سه است که عامل بیش از 70  درصد این عفونت ها ست .  در درمان این عفونت های باکتریایی از آنتی بیوتیک های مختلف استفاده می شود . متاسفانه استفاده بیش از حد از این داروها منجر به پیدایش مقاومت در بین این عوامل عفونی شده است. تا سالهای اخیر تصور می شد که انتقال مقاومت به آنتی بیوتیکها در باکتری ها عمدتا به طریق كونژوگاسیون و ترانسداكشن توسط پلاسمیدها، فاژها وترانسپوزونهای حمل کننده ژنهای مقاومت صورت می گیرد. اما در سال 1995Hall وCollis مکانیسم دیگری از انتقال ژن مقاومت به انتي بيوتيك راشناسایی کردند که توسط عناصری به نام اینتگرون انجام می شود .نقش اینتگرون ها به عنوان عناصر ژنتیکی متحرک در انتقال افقی مقاومت آنتی بیوتیکی مشخص شده است. اینتگرون ها عناصری هستند که می توانند در پلاسمیدها، کروموزوم ها و یا ترانسپوزون ها جای گیرند. این عناصر از جمله فاکتورهای دخیل در توسعه مقاومت های چند گانه بوده و همانند پلاسمید ها و ترانسپوزن ها جز مولفه های ژنتیکی متحرک در کسب و انتشار عوامل مقاومت می باشند.  5 کلاس مختلف از اینتگرون ها شناسایی شده اند که اینتگرون های کلاس I به طور متداول در ایزوله های بالینی باسیل های گرم منفی از جمله اشریشیا کلی یافت و منجر به انتشار مقاومت چند گانه آنتی بیوتیکی و مشکلات جدی درمانی در سراسر جهان گردیده است.  یک ارتباط قوی بین حمل اینتگرون و افزایش مقاومت به تعدادی از کلاس‌های مختلف آنتی بیوتیکی وجود دارد. با توجه به اینکه ژن‌های مقاومت بروی اینتگرون‌ها قرار دارند که می‌ توانند از یک سویه به سویه دیگر منتقل شوند و مقاومت را در بیمارستان یا دیگر محیط های درمانی منتشر نمایند لذا این امر اهمیت شناسایی این نوع از ژن‌های مقاوت آنتی بیوتیکی را دو چندان کرده و تعیین شیوع این ژن ها جهت اجرای برنامه‌های کنترل عفونت و همچنین مقاومت آنتی بیوتیکی و ممانعت از انتشار عفونت های ناشی از این ارگانیسم را ضروری می نماید.

     

    فهرست مطالب:

    چکیده

    مقدمه

    1-1 انتروباکتریاسه

    1-1-1 طبقه بندی

    1-1-2مورفولوژی وساختمان

    1-2 - اشریشیا کلی

    1-2-1- طبقه بندی

    1-2-3-  شکل باکتری

    1-2-4-  اختصاصات کشتی و بيوشيميایي

    1-3- ساختمان آنتی ژنی اشریشیا کلی

    1-3-1-آنتی ژن های سوماتیک یا آنتی ژنO

    1-3-2-  آنتی ژن کپسولی یا آنتی ژن K

    1-3-3- آنتی ژن H یا پیلی

    1-4- .توکسین های اشریشیا کلی

    1-4-1 انتروتوکسین ( اگزوتوکسین

    1-4-2 وروتوکسین ( توکسین شبه شیگا

     1-5-  عفونت های اشریشیا کلی

     1-6- انواع اشریشیا کلی

    11-6-1 اشریشیا انتروپاتوژن

    1-6-2- اشریشیا انتروتوکسیژن

    1-6-3-اشریشیاکلای مهاجم

    1-6-4-  اشریشیا انترواگریگیسیو

    1-6-5-اشریشیا انتروهموراژیک

    1-6-6- ایشرشیا کلی منتشر شونده روده ای (DAEC

    1-6-7 –ایشریشیا کلی اوروپاتوژنز (UPEC

    1-7-آنتی بیوتیک ها

    1-7-1- طبقه بندی آنتی بیوتیک ها

    1-7-2- مکانیسم اثر داروهای ضد میکروبی

    1-8- مقاومت در برابر داروهای ضد میکروبی

    1-8-1- غیر فعال کردن برخی از داروها

    1-8-2- تغییر در نفوذ پذیری داروها

    1-8-3- تغییر در ساختار میکروارگانیسم ها

    1-8-4- تغییر مسیر متابولیسمی میکروب ها

    1-9  اینتگرون ها

     1-9-2 ساختار اینتگرون ها

     1-9-3- انواع اینتگرون ها

    1-9-3-1 اینتگرون های کلاس 1

    1-9-3-2 - اینتگرون های کلاس II 

    1-9-3-3- اینتگرون های کلاس III

    1-9-3-4- اينتگرو نهاي كلاس IV (سوپراينتگرون ها)

    1-10- كاست هاي ژني

    1-10-1- ساختار كاست هاي ژني

    1-10-2- بيان كاست هاي ژني

    2-1-  مواد مورد استفاده 

    2-1-1- محيط هاي كشت 

    2-1-2 ساير تركيبات

    2-1-3-وسایل مورد استفاده

    2-2- جمع آوری نمونه

    2-3- تشخيص آزمايشگاهي

    2-3-1-رنگ آميزي گرم

    2-3-2 - تست اكسيداز

    2-3-3 - تست كاتالاز

    2-3-4- تست‌هاي بيوشيميايي

    2-3-4-1- آزمايش استفـاده از سيـتـرات           

    2-3-4-2-آزمايش تحرك و توليد اندول    

    2-3-4-3-آزمايش متيل‌رد (MR

    2-3-4-4-آزمايش Voges Proskauer (VP                     

    2-3-4-5-آزمايش TSI (  Triple Suger Iron Agar          

    2-4 نگهداري سويه‌ها         

       2-5 تست آنتی بیوگرام

    2-5-1 - مواد و وسایل مورد نیاز         

     2-5-2- تست انتی بیوگرام  

    2-5-3- روش تهیه 5/ مک فارلند        

    2-5-4- طرز تهیه سوسپانسیون باکتریایی معادل غلظت نیم مک فارلند          

    2-5-5- روش کار تست حساسیت آنتی بیوتیکی

    2-5-6- نحوه تلقیح سوسپانسیون باکتریایی به محیط مولر هینتون آگار

    2-6  دیسک های مورد استفاده در این آزمایش                          

    2-7- کنترل کیفی دیسک های مورد استفاده                

    2-7-1 بررسی تست های حساسیت

    2-8- استخراج DNA                       

    2-8-1 كـشـت باكـتري‌ها بر روي محـيط مايع لـوريا برتانی (LB) Louria Bertani

     2-8-2  اسـتـخـراج DNA به روش كيتBIONEER                        

    2-8-3- بررسی کمی DNA ژنومیک                 

    2-9- واكنش زنجیره پلیمرازی ( ( PCR              

    2-9-1-مـواد لازم بـراي PCR

    2-9-2 پرايـمرها ی مورد استفاده

    2-9-2-1- آماده سازي پرايمرها

    2-9-3- اجزای واکنش PCR

    2-9-4- آماده سازي مخـلوط اصلي ( Master mix )  براي واكـنـش PCR :

    2-9-5-شرایط تکثیرژن Int1 

    2-9-6- شرایط تکثیرژن Int2 

    2-9-7- شرایط تکثیرژن Int3

    2-10- الکتروفورز                

    2-10-1  - مواد مورد نياز براي ساخت ژل آگاروز

    2-10-2-تهیه بافر تانک الکتروفورز 

    2-10-3- روش تهيه ژل آگاروز 

    2-10-4 - عـكسبـرداري از ژل

    3-1 - شناسایی و تعین هویت باکتری ها

    3-2 - نتایج حساسیت آنتی بیوتیکی

    3-2-1 الگو های مقاومت آنتی بیوتیکی

    3-3- نتایج  حاصل از بررسی مولکولی کلاس های مختلف اینتگون ها در ایزوله های بالینی تحت بررسی:

    3-3-1 فراوانی ژن int 1 در بین ایزوله های مقاوم به آنتی بیوتیک های مختلف :

    3-3-2 فراوانی ژن int 2 در بین ایزوله های مقاوم به آنتی بیوتیک های مختلف :

    4-1– بحث

     4-2- نتیجه گیری

    4-3 – پیشنهادات

     منابع فارسی

    منابع لاتین

     

     

     

    فهرست جداول

    جدول1-1خانواده آنتروباکتریاسه

    جدول2-1 غلظت محلول های مختلف جهت تهیه محلول های استاندارد مک فارلند

    جدول2-2جدول 2-3 مشخصات مواد در  واکنش 25 میکرولیتری PCR

    جدول2-4 شرایط تنظیم دستگاه ترموسیکلر برای ژن های qnrC و qnrS

     جدول2-5 ترکیبات بافر

    جدول3-1مشخصات دیسک های آنتی بیوتیکی به همراه قطر هاله

    جدول3-2 فراوانی مقاومت اشریشیا کلای نسبت به انتی بیوتیک های کینولونی و فلوئوروکینولون

    جدول3-3 فراوانی نسبی ژن های qnrSو qnrC در بین نمونه های مقاوم  به نالدیکسیک اسید

    جدول3-4 درصد فراوانی نسبی ژن های qnrSو qnrC در بین نمونه های مقاوم  به سیپروفلوکساسین

    جدول 3-5  توزیع ژن های qnrA، qnrB  و qnrS در بین گونه های مختلف باکتریایی

               

     

     

    فهرست اشکال

    شکل 1-1 ساختمان آنتی بیوتیک های نالیدیکسیک اسید و سیپروفلوکساسین

    شکل 3-1: نمایی از تست آنتی بیوگرام

    شکل 3-2:  نمایی از ژل آگارز 1 درصد جهت مشاهده محصولات PCR ژن qnrC

    شکل 3-3: ژل آگارز 1 درصد

     

     

     

     

     



    برچسب ها: دانلود پایان نامه ارشد زیست شناسی میکروبیولوژی پروژه ارشد زیست شناسی پایان نامه کارشناسی ارشد میکروبیولوژی ایزوله های اشریشیا کلای انواع اشریشیا کلی مقاومت در برابر داروهای ضد میکروبی انواع اینتگرون ها كاست هاي ژني محيط هاي كشت تست كاتالاز
  • مناسب جهت استفاده دانشجویان ارشد زیست شناسی
  • در قالب فایل word و قابل ویرایش
  

به ما اعتماد کنید

تمامي كالاها و خدمات اين فروشگاه، حسب مورد داراي مجوزهاي لازم از مراجع مربوطه مي‌باشند و فعاليت‌هاي اين سايت تابع قوانين و مقررات جمهوري اسلامي ايران است.
این سایت در ستاد سازماندهی ثبت شده است.

درباره ما

فایل اُکی صرفا یک طرح کارآفرینی مشارکتی است با هدف درآمد زایی برای دانش آموزان، دانشجویان، محققان و کاربران اینترنتی-تاسیس:1394

  • پشتیبانی کاربران با آی دی - Telegram : csmok - Eitaa : fileok
  • info@fileok.ir

با همکاری و حمایت:

تمام حقوق این سایت محفوظ است. کپی برداری پیگرد قانونی دارد. طراحی و پیاده سازی وبتینا
نماد اعتماد الکترونیک

تمامي كالاها و خدمات اين فروشگاه، حسب مورد داراي مجوزهاي لازم از مراجع مربوطه مي‌باشند و فعاليت‌هاي اين سايت تابع قوانين و مقررات جمهوري اسلامي ايران است.
این سایت در ستاد سازماندهی ثبت شده است.